تحليل النقرس / Uric acid / حمض البوليك

- قد يدخل ضمن طلب تحاليل وظايف الكلى اذا طلب الطبيب قياسه في البول ليتبين اذا كان هناك حصوات  في الكلى او لايوجد  ... او اذا كان المريض شفي من الحصوات التى كان يعانى منها بالفعل .

- في الظروف الطبيعية يتحلل حمض اليوريك في الدم ويمر من خلال الكلية الى البول .... ولكن في بعض الاحيان  الجسم  ينتج كميات مفرطة من  ال Uric acid  ... أو تتخلص منه الكلى بكميات اقل مما ينبغى ..... وعند حدوث ذلك قد يتراكم حمض اليوريك مكونا بلورات حادة مثل الابر في احد المفاصل او الانسجة المحيطة بها  مما يسبب  الم والتهاب وتورم .

- تزداد احتمالية الاصابة بالنقرس في حالة ارتفاع معدل حمض البوليك في الجسم ... وقد تؤدى مضاعفات النقرس الى الاصابة بحصوات الكلى كما ذكرنا  .... حيث تتجمع بلورات اليورات في المسالك البولية مسببة حصوات الكلى  .. ولكن يمكن ان تقلل الادوية من خطر الاصابة بالحصوات .

* تحليل النقرس  ( Uric acid )  :- 

*   1 سم  من ال Reagent 

              +

  25 ميكرون  من  سيرم المريض 

* نتركهم 5 دقايق ونقيس على الطول الموجى المرفق.

* ونضرب الناتج في ال factor .

**** يمكن الاطلاع على  طريقة عمل ال  (factor )  من هذا المقال https://lab-hd.blogspot.com/2020/03/public-princebles-of-analysis.html

 

تحاليل وظايف الكلى / تحليل اليوريا ( البولينا )

تحليل اليوريا :-

* انبوبتين اختبار ( بلانك وتست )  .. كما ذكرنا تحاليل الكينيتك كلها انبوبة فقط او انبوبتين  (بلانك وتست ) على حسب التحليل المطلوب ... كما هو الحال معنا في هذا التحليل كالاتى :-

بلانك  =   1سم  R3 .

         + 50 ميكرون R2 " urease"  قطرة واحدة فقط  one drop.

         

تست =  1سم R3 . 

        +50 ميكرون R2 ( urease) one drop.

       +10 ميكرون سيرم .

       

** نترك الانبوبتين 5 دقائق  .

** بعد ال 5 دقائق  نضيف  ((200 ميكرون من R4 ))  على  الانبوبتين .

** ثم نتركهم 10 دقائق اخري ونقيس لاخذ القراءة .

ملحوظة :-

        اليوريا هي البولينا  وهى  URIC ACID  ( حمض البوليك )  وهو تحليل النقرس الذى سنتناوله في المقال القادم ان شاء الله .

 

تحاليل وظائف الكلى (kidney function) / تحليل الكرياتينين

وظائف الكلى من اهم التحاليل الطبية واكثرها طلبا وهى :- 

(1) - createnine  الكرياتينين .

(2)- blood urea  اليوريا (البولينا ) .

اذا تم تحديد نوع واحد فقط من قبل الطبيب نكتفي به ولكن اذا طلب وظائف كليه ولم يحدد بيتم عمل النوعين ( يوريا - كرياتينين ) .

ونحن في هذا المقال بصدد الكرياتينين  .

تحليل الكرياتينين :

اولا :  مرحلة تجهيز العينة أو ( فصل البروتين )  

*(  500 سيرم  +  500 TCA  )  نرجهم جيدا وبقوة اما عن طريق كيس او غطاء الانبوبة  او بالسحب والطرد بالبيبتة .

* ثم يتم تدوير هذا الخليط في السنتر ونتركه يفصل حوالى 5 دقائق  ... لينتج عنه سائل رائق يسمى 

" supernetent "  ويكون هذا السائل هو عينة الشغل مثل السيرم  او ( بديل السيرم ) .

وبعد هذه المرحلة الاتي :- 

3 انابيب  ( بلانك  B - ستاندرS  - تست T )  .

*  (B)  = 250 ميكرون  R3 ابيض +  250 ميكرون R2 اصفر + 250 ميكرون TCA 

+ 250 ميكرون ماء مقطر  ( نلاحظ 250 TCA +  250 ماء مقطر مجموعهم 500 مثل مانحتاجه من العينة ) .

*(S )  =  250 ميكرون R3

        +   250 ميكرون R2

         + 250 ميكرون TCA

          +  250 ميكرون STANDER 

( ونلاحظ TCA + STANDER = 500 )  مثل العينة .

* (T)  =   250 ميكرون R3

          + 250 ميكرون R2

           +  500 من العينة (supernetent) 

** نتركهم ثلث ساعة  .... ثم نقرأ .

ملحوظة مهمة :-

    

يتم التعامل مع ال stander في كل التحاليل على انه عينة  .. وتتم عليه نفس الخطوات التى تتم على العينة .

بمعنى  ... اذا اخدنا 10 ميكرون   (سيرم )  نأخذ  10 ميكرون من  (الستاندر )

             اذا اخدنا 100 سيرم     ناخد 100  ستاندر      وهكذا 

                                         -: الاااا :- 

في حالة الكرياتينين  فقط 

  اذا اخدنا 100 من العينة  مثلا  ناخد نص ستاندر فقط  يعنى 50 وال 50 الاخرى TCA 

حتى نكمل 100 في انبوبة ال ستاندر 

وعليه :-

    فاذا اخدنا 500 من العينة (SUPERNETENTN)  

نأخذ في انبوبة ال ستاندر   250ST  +250 TCA  لاكمال 500 مثل العينة .

       ( وهذا في الكرياتينين فقط ) 

    

تحليل الكرياتينين كاينيتيك  (Kinetic) :

وهى طريقة اخرى لتحليل الكرياتينين " الطريقة السريعة " ب لغة المعمل العملية 

وهى الطريقة المتبعة اساسا لانها الاحدث والاسرع والاسهل .... وهى متبعة كذلك فى كل تحاليل الكمياء .. ولها كيماويات خاصة بيها غير كيماويات الطريقة التقليدية في التحاليل 

ولكن وجب ذكر الطرق  التقليدية التى سبق واتعاملت بها لان هناك اماكن لازالت بدائية وتقليدية  اكثر من غيرها .. وبالمناسبة ممكن تكون مستشفيات (خاصة الحكومية ) وليست المعامل الخاصة فقط  ..لذا وجب التنويه

ولكن  اذا توفر العمل بالطريقة الكينيتيك فهى الافضل اكيد .

طريقة تحليل الكرياتينين كاينيتيك : 

وفي هذه الطريقة نستعمل انبوبتين فقط  ( ستاندر - تست ) 

* ستاندر =250من R3 ابيض

             +250 من R2 اصفر

            + 50 ميكرون من ال ST (ونضعه عند القياس مباشرة -- يعنى نرمى ونقيس علطول لاننتظر اى وقت )

* تست = 250 R3 ابيض

        + 250 R2 اصفر 

         + 50 ميكرون سيرم ( عند القياس مباشرة )

وكما ذكرنا .. في حالة ال Kinetic  يمكن وضع المحاليل (reagents ) وتركها ولكن لانضع ستاندر ولا العينة الا عند القياس مباشرة  

بحيث نرمى ونقلب ونقيس ... لان ال kinetic  لا ينتظر .

ملحوظة عملية  مهمة :

 في حالة وظايف الكلى (اليوريا - الكرياتينين )

ممكن اليوريا تكون عالية والكرياتينين طبيعى   وهذا يحدث  فى مرضى الكبد  يعنى يكون الكبد هو اللى تعبان .

اما لو كان مريض كلية يعنى الكلية اللى تعبانة  لازم الاتنين يكون عالى  .

 

تحليل الكرياتينين كليرانس  (createnin  clearnce ) : 

 - هذا التحليل مهم جدا واساسي قبل مرحلة الغسيل الكلوى 

-وعلى اساسه يتم تحديد اذا كان المريض يحتاج عمل غسيل كلوى اولايحتاج .

وهو كالاتى :- 

(1)- نجمع بول 24 ساعة ونعرف حجم البول بعد ال 24 ساعة ( لتر - 2 لتر ...... الخ ).

(2)- نعمل كرياتينين في البول :

          ويتم التعامل مع البول كأنه عينة دم تماما ونضعه في السنتر لفصله ثم نقيس الكرياتينين في البول .

(3)- نعمل الكرياتينين في الدم ( كالمعتاد ) .... ونأخذ قراءة الكرياتينين في الدم 

(4)- نعوض في المعادلة الاتية : 

                               حجم البول بتاع ال 24 ساعة ×  قراءة الكرياتينين في البول

                              _______________÷

                          

                                1440 (رقم ثابت )  × قراءة الكرياتينين في السيرم 

* وهذا النوع من تحاليل الكرياتينين غير متداول في المعامل الخارجية ولكن اكثر تداول في المستشفيات .

 

 

تحليل ال PTT او الثرومبوبلاستين

 تحليل PTT: 

تابع لتحاليل السيولة  وهو مثل تحليل PT مع بعض الاختلاف كالتالى وكما موضح بالصورة 

** انبوبة فيها 

 1.8 سم دم  +  0.2 سترات ( 200ميكرون) ونفصلهم  في السنتر 

وبعد الفصل ناخد 100 ميكرون من البلازما  ونضيفها على الانبوبتين  مباشرة 

** ثم نضعهم في الحضانة 

** والانبوبتين ( محاولتين يعنى)  ... كل انبوبة فيها 100 ميكرون من محلول ال PTT

** بعد التحضين نعاير ال STOP WATCH   ونرمى 100 ميكرون من الكالسيوم كلوريد في الانبوبتين ونقلب بنفس الطريقة السابقة لل PT 

**نأخذ  قراءة الساعة مباشرة وتكون دى النتيجة ...فلا يوجد جدول ولا مقارنة نتائج في PTT 

مثل ال PT 

PTT ....up to 45   فوق 45 مش طبيعى

اقل من 45  normal

مقارنة بين ال PT   &    PTT   : 

PT :

* Regent  :  200 ميكرون 

* معايرة ال stop watch  ووضع البلازما  (( بعد )) التحضين  

ولايضاف شئ بعد لك  ثم نحسب زمن تكون الجلطة .

* يوجد مقارنة نتائج مع البنفليت المرفقة .

PTT  :

*    Reagent  :  100 ميكرون

* وضع البلازما  ((  قبل  ))  التحضين  ومعايرة الستوب ووتش يكون مع اضافة كالسيوم كلوريد بعد التحضين .

* لايوجد مقارنة نتائج مع البنفليت .

ملحوظة عملية  :

يتم تجهيز انبوب ال PT & PTT  في المعمل  اى يتم طلبه من المعمل .. فعندما تأتى ممرضة تطلب

انبوبة PT  &PTT  ... فنقوم بتجهيز انبوبة بوضع فيها 100 ميكرون سترات الصوديوم  حتى تضيف هي عليها 1.8 سم دم وتقلبهم جيدا لبدء العمل .... ولازم مايكونش فيه اى جلطة متكونة مهما كانت صغيرة ومش باينة .. يجب الانتباه جيدا .

تحليل البروثرومبين / PT و تحليل الثرومبوبلاستين / PTT

 PT & PTT :

وهي تحاليل الجلطات  أو قياس نسبة السيولة في الدم .

وغالبا يتم طلب النوعين معا كما ان طريقة العمل تقريبا واحدة  ومتشابهة  مع بعض الاختلاف البسيط

كما سنوضح فيما يلي :

تحليل PT :

1.8سم دم  +  200 ميكرون سترات (مادة مانعة للتجلط مثل ال EDETA )

نقلب برفق وجيدا ثم نفصلها في السنتر وندخلها الحضانة مع الانبوبتين التاليتين  والانبوبتين كل 

انبوبة تحتوى على 200 ميكرون من محلول  Reagent ال PT 

وهما انبوبتين لانها محاولتين .

نترك الجميع في الحضانة مدة كافية .... والمدة المناسبة للتحضين عندما نلمس الانبوبة نجدها دافئة تكون هكذا مناسبة .

** بعد التحضين نأخذ 

100ميكرون من البلازما  +  200 ميكرون من PT   في احد الانابيب 

** نعاير ال stop watch .... ونرمى ال 100 ميكرون بلازما مع بدء ال stop watch مباشرة 

مع التقليب بالبيبيت ونلاحظ جيدا متى ستحدث الجلطة في الانبوبة 

** والطبيعى ان تحدث بعد 12 ثانية  واذا زادت تكون هناك سيولة 

ثم نقارن الناتج بالجدول الخاص بال PT  المرفق في البنفليت.

ملحوظة مهمة :

في تحاليل PT & PTT  

يشترط عند سحب العينة ان تكون مسحوبة من الوريد مباشرة  وليس من اسطرة (في حال كان المريض مركب اسطرة )  

حيث ان الاسطرة تكون ممتلئة بمادة الهيبارين المانعة للتجلط  وممكن تعطى النتيجة Over range

والعينة اصلا normal.

واذا تم السحب بالطريقة الصحيحة ولم يحدث تجلط لانكتب time (وقت التجلط  فى الستوب واتش)  او INR (وهو ناتج التحليل في الجدول )

ولكن نكتب النتيجة (Over range)  فى الريبورت المقدم للطبيب .

ملحوظة مهمة : 

          لتبيان بعض كلمات نشرة ال PT والتى نقارن بها النتائج 

* INR  :  وهو نسبة السيولة في الدم .. يعنى صيغة التحليل ممكن تكون طلب تحليل INR فنفهم ان المطلوب تحليل PT.. بيتم طلبه بالصيغتين .

* Control : 

وهذه الكلمة في البنفليت يندرج تحتها متوسط الثوانى الذى يتم مقارنة النتيجة به لنحدد نسبة ال INR

وهذا الCONTROL ممكن يكون 12.5  أو  13.5 وهما الشائعان  .

* ISI :

وهى زجاجة ال REAGENT الخاصة بال PT  ...ولها ورقة مكتوب عليها  النورمالات  

وبناءا على هذا المحلول بيتم عمل المتوسط بتاع ال CONTROL اللى بنقيس عليه 

يعنى لو الشركة اتغيرت ممكن متوسط الكونترول يتغير اما لو نفس الشركة فغالبا نفس الكونترول .

والمقال القادم عن الPTT....وهو ملازم لل PT  كما سنرى مع المقارنة بينهما ..

See you 👇 

تحليل \ توتال بروتين (Total protein ) \الالبيومين \الجلوبيولين \ وتحليل Ration

 تحليل ال Total protein:

التوتال بروتين هو عبارة عن كلا من :

الالبيومين  و    الجلوبيولين  

ويتم عمله كالاتى :

1cm   R   +   20 m     sirum 

نتركهم 10 دقايق في الحرارة العادية ونقيس على طول موجى حسب النشرة المرفقة بالمحلول .

ولكن  النوع الاول من( التوتال بروتين)   وهو (الالبيومين )هو الاكثر طلبا ضمن تحاليل وظايف

 الكبد .

وهو كما يلى :

تحليل الالبيومين :

تحليل : الالبيومين 

وهو من التحاليل المهمة في وظايف الكبد ويتم في خطوة واحدة كالتالي:

2,5 سم من ال reagent (وهو نوع واحد فقط)  +  10 ميكرون سيرم .

يعنى لو عندنا 3 انابيب (blank - stander - test ) هتكون كالاتى :

B  =  2.5cm reagent

S  =2.5cm r  +  10 m stan 

T= 2.5  r  + 10m   of sample

واذا كنا عاملين factor   خلاص نتعامل مباشرة 

ولانعمل stander  لانة بيتعمل اول مرة فقط  .

او بيكون الشغل على حسب البنفليت المرفقة  ..

ملحوظة مهمة :

لازم نراعى ان طريقة الشغل بتتجدد كل فترة وبيتم تحديثها باستمرار على حسب الشركات والاجهزة المعملية المستحدثة  لكن نظرية الشغل واحدة ... فقط وجب التنويه حتى لايستغرب احد كلامى او يشعر انه قديم . فأنا اذكر ماتعاملت به فقط من واقع خبرتى الشخصية  ولكنى ارجو ان يكون مفيدا لمن هم في اول الطريق .. مع الانفتاح طبعا مع ماتعاصرونه من تجديد .

وشكرا 

تحليل \ الجلوبيلولين : 

لكى نحصل على الجلوبيلولين   يكون من  طرح الالبيومين من التوتال بروتين 

Globulin  =  Total protin  -  Albumin  .

تحليل  Ration : 

ويتم الحصول عليه من ناتج قسمة الالبيومين   على   الجلوبيولين 

 Ration  =  Albumin   

-----------

Globulin

تحليل الصفراء أو البليروبين / Bilirubin

تحليل الصفراء أو البليروبين / Bilirubin

أنواع تحاليل الصفراء:

(١)-  Total    كلية .

(٢)- Direct   مباشرة .

       هذان النوعان هما الأساس وكل الشغل

(٣)-  In direct    غير مباشرة .

لكى نحسب ال indirect لابد أولا أن نأتى ب total &  direct   ثم نطرحهم من بعض عشان نجيب ال indirect  لان مفيش شغل كيمياء لل indirect ودائما تأتى من الاثنين السابقين .

ملحوظة : 

كمية السيرم المستخدمة في تحليل البليروبين المفروض تكون ١٠٠ ميكرون في ٤ أنابيب ٢ total.

         2 direct 

ولكن إذا كانت الكمية صغيرة جدا بسب اخذها من طفل حديث الولادة مثلاً أو لأى سبب عند المريض لذلك لابد من تخفيفها بأخذ 100 ميكرون مرة واحدة فقط   ونخففها ب400 ميكرون من محلول ملح saline 0.9  ولكن نراعي هذا التخفيف بضرب الناتج النهائي *5 ⁦⬅️⁩  400 : 100

                                               ⁦⬇️⁩

                                مجموعهم =500

وهذا ليس في البليروبين فقط ولكن إذا استخدمنا التخفيف في اى تحليل نراعي ضرب الناتج النهائي في التخفيف .

التخفيف: 🤗

مثلا : 

إذا استخدمنا 100 ميكرون سيرم: 400  سالين. ⁦⬅️⁩ نضرب *5 

استخدمنا 100سيرم :700 سالين ⁦⬅️⁩ نضرب *8

استخدمنا 100سيرم : 500 سالين ⁦⬅️⁩ نضرب*6

              ⁦⬇️⁩⁦⬇️⁩

وهكذا نضرب * مجموعهم .

إذا استخدمنا 50 ميكرون سيرم : 500 سالين مثلا ⁦⬅️⁩⁦⬅️⁩ نضرب *11 

لان ال500 فيها عشرة خمسينات + 50 سيرم  يكون الناتج 11 .

*** يتم عمل تحليل ال total و الdirect
 معا وهو كالاتى : 

ملحوظة : 

Total & Direct 

يعتبران تستان مختلفان اى أن لكل منهما تصفير مستقل وطول موجى مختلف .

الطول الموجي لل total = 578 أو 580

الطول الموجي لل direct= 546  أو اقرب رقم في الجهاز ⁦⬅️⁩ وتضرب الناتج * الرقم الثابت في البنفليت * التخفيف 5 مثلا .

أنواع الصفراء : 

١-  فسيولوجية ⁦⬅️⁩  لحديثي الولادة .

٢- كبدية ⁦⬅️⁩ نتيجة فيروس .

٣- مرارية ⁦( انسدادية ) ⁦⬅️⁩  نتيجة حصوات في القناة المرارية .

⁦✍️⁩ المرارية مثل الكبدية تماما ولكن :-

⁦👈 المرارية ⁦⬅️⁩ تظهر في الدم ولا تظهر في البول .             بينما 

👈 الكبدية ⁦⬅️⁩ تظهر في البول وتجعله مثل الشاي .

         ⁦⬅️⁩ كما أن ال total يكون عالى و ال direct  أيضا عالى .

⁦✍️⁩ وللتفرقة إذا كانت الصفراء كبدية أو مرارية يتم عمل اختبار فيصل وهو ( الكشف عن الصفراء في البول ) وذلك باستخدام اليود 0.9 %  كالاتى ،

تحليل الكشف عن الصفراء في البول بواسطة اليود 0.9% :

تظهر حلقة خضراء بين البول واليود (لونه بنى) وفي هذه الحالة يكون البول به صفراء ⁦⬅️⁩ إذن الصفراء هنا كبديه لانها ظهرت في البول .

أما إذا لم تتكون هذه الحلقة تكون الصفراء لم تظهر في البول وفي هذه الحالة تكون الصفراء مرارية .

⁦😉⁦✍️⁩ ملحوظة فنية 😉⁦✍️

إذا لم تتوفر هذه الطريقة ..يُمكن رج أنبوبة البول بقوة حتى تتكون رغوة اعلى البول ومشاهدة لون هذه الرغوة ..

أن كانت الرغوة بيضاء ⁦⬅️⁩ فلاصفراء في البول وتكون مرارية .

أما إن كانت رغوة صفراء يكون هناك صفراء في البول وتكون في هذه الحالة كبدية .

                      

تحليل SGPT & SGOT / أحد اهم تحاليل وظائف الكبد

تحليل  SGPT  &  SGOT  /  أحد اهم تحاليل وظائف الكبد 

وظائف الكبد من التحاليل المهمة جدا والرئيسية في مجال التحاليل الطبية وهى عدة تحاليل كما ذكرنا  نستعرض منها في هذا المقال  SGPT   &   SGOT  .

تحليل ال GPT  &  GOT  غالبا مترافقين اى يتم عملهم مع بعض  ولهم نفس وقت التحضين و نفس خطوات العمل مع اختلاف انواع المحاليل Reagents  المستخدمة لكل نوع .

النوعين ليس لهم standerd ولكن blank &  test  فقط ...وهذا في النوع التقليدى من التحاليل اما التحليل ال kinetic نستخدم فيه انبوبة واحدة فقط  وهى ال test .

ومن المعروف ان التحاليل التقليدية  تأخذ وقتا اطول لانجاز التحليل وجهدا اكبر ايضا من التحاليل ال fixed او ال kinetic  وهى الاسهل والاسرع .

وفى هذا المقال سوف نستعرض الطريقتين في عمل التحليل ... وان كان اللجوء اليوم اكثر الى النوع السريع ولكن قد يتواجد النوع التقليدى ايضا خاصتا في المعامل ذات التجهيز العادى  أو البسيط والذى يتناسب اكثر مع امكانيات معظم المبتدئين وحديثى التخرج ...وهى الفئة المستهدفة اساسا في هذه المدونة .. لذا وجب التنويه 😃 ....

# # الطريقة التقليدية لعمل تحليل SGPT  &  SGOT :-

1-SGPT = ALT :

الشغل بأنبوبتين اختبار  فقط BLANK   &    TEST 

(  اللى بيتعمل في اى انبوبة بيتعمل في التانية  يعنى استخدمت محلول  اوReagent  _واختصاره معانا ""R"" _ في واحدة بتستخدمه في التانية ... الفرق بينهم ان انبوبة ال T بيزيد عليها سيرم او عينة المريض ......... كذلك لو تحليل هنستخدم فيه STANDERD  يبقى برضو نفس الخطوات على الانابيب الثلاثة ولكن بيزيد محلول ال ST في انبوبة ال ST .... والسيرم في انبوب T.


يتم التحليل على 3 خطوات كالاتى ؛-

(1)- بلانك = 250 ميكرون R1 الخاص بال GPT .
    - تست = 250 ميكرون R1
                        +
                 50 ميكرون سيرم
    ( نتركهم نص ساعة في الحضانة  )  .
                                         وبعد النص ساعة وفي نفس الانابيب نضيف

(2)- بلانك = 250 ميكرون R2 .
    - تست = 250 ميكرون R2 . 

     ( نتركهم 1\3 ساعة في الحضانة )
                                         وبعد التلت ساعة وفي نفس الانابيب نضيف


(3)- بلانك = 2,5 سم صوديوم هيدروكسيد .
    - تست = 2,5 سم صوديوم هيدروكسيد .
                 
           (نتركهم 5 دقائق في الحضانة )

..... نقيس بعد ال5 دقائق وتكون قراءة الجهاز هى الناتج  .... ولكن اذا كان لها مقابل في البنفليت تكون
                                                   
                                             مقابل القراءة هى الناتج .

2- SGOT = AST  : 

   نفس التحليل بالضبط مع استخدام محاليل GOT  .... ويتم خطوة بخطوة مع GPT .. يعنى الراك بيكون فيه 4 انابيب اختبار    2 لل GPT    

                           2 لل GOT 

وهكذا  فهو كالتالى : 

(1)- بلانك = 250 ميكرون R1 الخاص GOT .

    - تست = 250 ميكرون R1  

                         + 

                 50 ميكرون سيرم 

       (نتركهم نص ساعة في الحضانة )   

                                                

                                         وبعد النص ساعة وفي نفس الانابيب نضيف 

(2)- بلانك = 250 ميكرون R2   الخاص ب GOT .

    -تست = 250 ميكرون R2 . 

        ( نتركهم  تلت ساعة في الحضانة ) 

                

                                        بعد تلت ساعة وفي نفس الانابيب نضيف 

(3)- بلانك = 2,5 سم صوديوم هيدروكسيد . 

    - تست = 2,5 سم صوديوم هيدروكسيد . 

        (نتركهم 5 دقائق في الحضانة ) .

 ونقيس بعد الخمس دقائق كما سبق  .. والنتيجة طبعا بتطلع مع بعضها في نفس الوقت نقيس الGPT ثم GOT مباشرة . 

# الطريقة ال Kinetic لعمل تحليل SGPT   &    SGOT  : 

    وكما ذكرنا .....كل التحاليل اذا اتعملت بالطريقة الكينيتك  لايوجد لها  Blank وبتكون standerd , test فقط  .

    وفي حالة ال SGPT  &  SGOT    لايوجد لها standerd  اساسا حتى في التحاليل التقليدية كما شاهدنا  ......  لذلك في حالة الكينيتيك  تكون انبوبة واحدة فقط  وهي ال test  ..... كالتالى :

 ملحوظة :

            البنفليت الخاص بعلبة الكيماويات بيختلف من شركة لاخرى  يعنى لابد من قرائتها اولا لمعرفة نسب المحاليل التى سوف تستخدم  .... والكلام هنا عن الطريقة العملية التى مارستها بنفسي .. وليست قاعدة  ... .... يعنى على حسب كل بنفليت وطريقة شغلها  ....  والعلبة هنا بها نوعين من ال Reagents   >>> أحدهما ابيض والاخر اخضر 

    

 والعمل كالاتى  لكلا التحليلين :

  

*** أنبوبة SGPT فيها من المحاليل الخاصة بها :

                         400 ميكرون من R الابيض  

                                         +

                         100 ميكرون من R الاخضر 

                                                

                                                           -: كذلك :-

*** أنبوبة SGOT  فيها من المحاليل الخاصة بها : 

                          400 ميكرون من R الابيض 

                                            +

                          100 ميكرون من R الاخضر  

  

( نتركهم في الحضانة حتى يتم تدفئتهما  جيدا ونكتب على كل انبوبة اسمها ) .

  

*** بعد التحضين الجيد لل Reagents  فقط  ..نكون محضرين الجهاز على القياس ولا نضع السيرم الا على القياس مباشرة  ...... نضع 50 ميكرون سيرم ونقيس مباشرة . 

ملحوظات مهمة :

كل تحاليل الKINETIC  كدة يعنى لانضع السيرم ابدا الا عند القياس فقط   ويكون بسرعة جدا يعنى نجهز كل شئ .. الجهاز وكمية السيرم المرادة  من قبلها ... نرمى السيرم .. نقيس علطول 😉 .

SGPT   لوعالى لازم يكون SGOT   كمان عالى , 

                      

                                                  - ولكن اذا كان -

SGOT عالى ممكن SGPT  يكون طبيعى  وهذا في حالات مرضى القلب . 

أما في حالات الصفراء  SGPT  & SGOT   يكونان عاليان في حالة الانسداد المراري . 

تحاليل وظائف الكبد / أهم التحاليل المطلوبة لوظائف الكبد

تحاليل وظائف الكبد / أهم التحاليل المطلوبة لوظائف الكبد 

هناك  تحاليل اساسية لوظائف الكبد .. وهى :-

1- تحليل  SGPT= ALT          &            SGOT=AST .

                         ↓                                                  ↓

    تحليل انزيم Aspartate transaminase                تحليل انزيم  Alanine transaminase

2- تحليل انزيم الكالين فوسفاتيز Alkaline  phosphatase (ALP 

3- تحليل  Billirobin   أو الصفراء بنوعيها : 

• Total .
• Direct .                 

4- تحليل Albumin    أو الالبيومين :

                        وقد تترتب عليه تحاليل أخرى بناءا على طلب الطبيب مثل :-  

• Total protein .
• Ration .             

5- تحليل البروثرومبين  أو   PT    &   PTT  .

        وهو تحليل السيولة او قياس سرعة تجلط الدم .

...  يطلب الطبيب من المريض عمل وظائف كبد  اذا ظهرت عليه بعض الاعراض التى قد تدل على تضرر الكبد مثل :-

• فقدان الشهية .
• الغثيان أو القئ .
• اصفرار العينين أو الجلد .
• انتفاخ البطن . 
• الضعف العام والتعب .
• البول الداكن .

.. اذا طلب الطبيب وظائف كبد  (ولم يحدد)   نعمل كله .

.. اما اذا طلب نوع معين نعمله فقط . 

 وسوف يتم شرح كل تحليل منفردا في مقالات قادمة ان شاء الله .

                     

                                             

Coomb's test \ اختبار كومبس

Coomb's test  \  اختبار كومبس 

وهو اختبار الاجسام المضادة  والمناعة الذاتية  ((AHG  او Anti-human Globulin ))  .

هناك نوعين من ال Coombs  test  : مباشر   .............. وغير مباشر . 

اذا تم طلب اختبار كومبس فمعناه  البدء في المباشر علطول فهو الاشهر والاكثر طلبا وهو ما سنتناوله في هذا المقال ... وذلك لانه من النادر جدا جدا ان يكون اختبار  Coombs المباشر  positive  لانه اذا طلع positive معناه ان الجسم بيهاجم نفسه    أو   الجهاز المناعى بيهاجم الجسم    أو ان المريض بيموت والشخص هالك ......  في هذه الحالة نلجأ لعمل اختبار Coombs  الغير مباشر ..

ولكن موضوع المقال وهو الاشهر والاكثر تداولا في المعامل :

  Coomb's test   المباشر :

 أولا : لابد من عمل خطوة  " غسيل الدم "  في البداية  ..

          ⇈

                وهي باختصار كالتالى ...  ويمكنك العودة الى الرابط  

    ...نحضر انبوبة ونملأها Saline الى ثلاث أرباعها  .

    ... نضع عليها  2:3 نقط دم    (( مأخوذ على Edeta  )) .

    ... نقلب  ونسنر  ونرمى الرايق .

    ... نأخذ الراسب ونضع عليه saline  مرة اخرى .... ونسنتر    ... ونرمى الرايق  .

    ... ناخد الراسب  ونضع saline   مرة ثالثة  ... ونقلب ..... نسنتر .... ونرمى الرايق  . 

** خطوة الغسيل 3 مرات وتتم ايضا في التوافق ..... ولكن الغسيل هنا لعينة  (((المريض ))) ...وليس (((المتبرع ))) كما في التوافق      نخلى بالنا 😔    

    ... بعد رمى الرايق للمرة الثالثة نأخذ   100 ميكرون من الدم RBCs   الى    100 ميكرون من محلول ال Coombs  .

   ... نتركهم 1\4   ربع ساعة في الحضّانة  ... ثم نفحص تحت الميكروسكوب  .

   ... اذا كانت كرات الدم بعيدة عن بعضها تحت الميكروسكوب يكون الاختبار Negative  وهى النتيجة 

       

      الغالبة  في الواقع  😏😊  ............    اما اذا كانت الكرات ملتصقة يكون الاختبار Positive  

                                                                                                                    ⇊⇊

                                                                                                                ( وهى النتيجة 

                                     النادرة  .. وعند حدوثها  فقط يتم عمل اختبار   Coombs  الغير مباشر) ..

وهكذا فان  ::

Coomb's test  الغير مباشر  : 

يتم عمله  في حالة كان اختبار Coombs المباشر ايجابي Positive   فقط .

العمل فيه على السيرم وليس الدم الكامل مثل المباشر . 

😏😏 نرجع لل Coomb's المباشر وحتة فنية  😔😤  

         

        ممكن بدل ربع ساعة في الحضّانة  ... نضيف بعد خطوة الغسيل مادة   ال AHG  أو محلول الكومبس الى الدم ونسنتر تانى  :➷➷ 

                                   اذا حدث تلزّن بعد السنترة يكون Positive .

                                   اذا لم يحدث                  يكون Negative .  

                                      

اختبار الدم التوافقي أو التوافق Cross matching / Compatibility

اختبار الدم التوافقي أو التوافق Cross matching / Compatibility

أبجدية ومقدمات التوافق هى " الفصيلة" .. أى أنه قبل عمل اختبار توافق لازم نعمل فصيلة للمتبرع وللمريض ... اذا طلعوا نفس الفصيلة نبدأ نعمل توافق ... وهذا يعنى ان في حالة الفصائل المختلفة لايصح اختبار التوافق اصلا .  

عينة المتبرع تكون مأخوذة على ادتا Edeta مانع تجلط يعنى بتكون دم كامل بينما عينة المريض سيرم .

لابد من عمل غسيل للدم .... والغسيل هنا لعينة (((المتبرع ))) . 

نسحب بالبيبت 100 ميكرون من المحلول او الدم المغسول وهو (( الراسب + 2سم Saline )) 

                                                       +

                                100 ميكرون من سيرم المريض            " يعنى أحجام متساوية "

                                                        +

                             نقطة أو قطرة من محلول Coombs 

                                                        +

                                نقطة أو قطرة من محلول Povine albumin بوفين البومين  

# هاتين الخطوتين  (  اضافة الكومبس والبوفين البومين )  بيوضحوا التوافق جدا تحت الميكروسكوب مثل  (مكياج للشريحة 😃 ) .

 نقلب الخليط السابق جيدا بالبيبت ونتركه 1/4 ربع ساعة في الحضّانة .

بعد التحضين نأخد نقطة  من هذا المحلول    " حوالي 10: 20 ميكرون بالبيبت "    ونفحصها تحت الميكروسكوب  .

اذا لاحظنا تباعد كرات الدم عن بعضها ورأيناها تسبح بحرية ولا يوجد أى التصاق بين الكرات ....اذن يكون هناك توافق بين العينات  ...

أما اذا كان هناك تجمع للكرات  ... اذن لايوجد توافق  . 

ملحوظة :-

لو لقينا كرتين دم ملتصقتين ممكن ننفخ فيها اثناء الفحص .. لو فك التشابك خلاص بيكون فيه توافق عادى ...لكن   اذا فك التشابك ورجعوا التصقوا تانى أو كانت اكتر من كرتين مثلا ملتصقين  3 مثلا فأكثر  خلاص كده مفيش توافق . 

الفصيلة وعامل الريسس/ أنواع فصائل الدم للمبتدئين

الفصيلة وعامل الريسس\ أنواع فصائل الدم للمبتدئين

*** يتم الكشف عن الفصيلة وعامل الريسس Rh ب 3 محاليل :

وهى محاليل في زجاجات صغيرة وبها قطّارة نضع قطرة واحدة  فقط من كل زجاجة على قطرة دم منفصلة ..حيث يتم أخذ 3 نقط  دم من المريض او الشخص المراد الكشف عن فصيلته  .

1- محلول Anti A :

وهو كاشف للفصيلة A .. لذلك عند التعرف عليها  يعمل معها تلزن او تجلط Aglutination . ... 

                                

كذلك باقى الكواشف  ..

2- محلول Anti B :

وهو كاشف للفصيلة B .. أى أنه اذا حدث تلزن تكون الفصيلة B .

3- محلولAnti D :

وهو محلول كاشف Rh  الموجب والسالب ..أى أنه اذا حدث تلزن تكون موجب RH واذا لم يحدث تكون سالب RH .

# اذا حدث تلزن مع محلول  A & B تكون الفصيلة AB .

#اذا لم يحدث تلزن مع محلول A & B  تكون الفصيلة O .

** ملحوظة :-

اذا طلعت العينة سالب RH نعيد عملها مرة أخرى لأن هذا النوع نادر .. لذلك يجب التأكد منها .

 AB+ :   مستقبل عام من السالب والموجب لكل الفصائل .

AB- :   مستقبل عام من السوالب فقط  "كل السوالب للفصائل الاخرى" .

O+ :    معطى عام لكل الموجب فقط . 

O- :     معطى عام لكل الفصائل  "السالب و الموجب" .

..(بوجه عام أى حاجة سالب تعطى السالب والموجب بتاع الفصيلة بتاعتها ) .


بينمااااااا (ننتبه):
AB+ البلازما 
وليس الفصيلة او الدم الكامل معطى عام لكل الانواع الموجبة حتى O+


AB- البلازما 
معطى عام لكل الانواع الموجبة والسالبة

🧫 الفصيلة الرخمة 😉😃......

-:بمعنى :-

أحيانا أثناء الشغل بتكون الفصيلة مش واضحة أو فصيلة صريحة اذا كانت A او B او O ... سالبة ... موجبة  

يعنى ممكن تكون عاملة تلزّن خفيف جدا مع اى نوع او عاملة موجب على خفيف جدا ... فيصعب تحديد نوعها ( ممكن نشوف الحالات دى اكتر في حديثى الولادة .. ممكن يكون الطفل دم الام لسة فيه أو منقول له دم أو بلازما .. والبالغين ايضا لاى سبب سواء نقل دم ايضا او ادوية متداخلة او اى سبب اخر .... يعنى أيا كان السبب فهذا يجعل الفصيلة غير واضحة وهذا لا يصح أبدا فلا يمكن التهاون في الفصيلة 

فالتهاون في الفصيلة قد يودى بالحياة على الجملة لا قدر الله ....

لذلك في هذه الحالة نلجأ الى خطوة مهمة وهى   "" غسيل  الدم ""    و هى كالتالى :-

• نحضر أنبوبة ونضع بها 2سم  Saline او محلول الملح المعروف .
• نضع عليهم نقطتين او 3 دم بمعنى نسحب حوالى 50 ميكرون او 100 ميكرون بالبيبت ونقلبهم جيدا في السلاين .

• نسنترالانبوبة اى ندورها في السنترفيوج دقائق قليلة ... يكون الناتج راسب في اسفل الانبوبة والجزء الرائق في الاعلى يتم التخلص منه (نرميه) .
• نأخذ الراسب ونضع عليه saline مرة أخرى ونسنتر ونرمى الرايق . 
• نأخذ الراسب للمرة الثالثة نضع عليه سالين ونقلب .. ونسنتر .. ..ونرمى الرايق . 

أى أن الغسيل 3 مرات وهذه الخطوة تسمى " خطوة غسيل " .. مهمة يعنى لازم نعرفها عشان هنحتاجها في أنواع تحاليل أخرى ...

• بعد خطوة الغسيل في المرة الرابعة يعنى  نضع حوالى 1سم saline على راسب الدم وندورهم في السنتر ايضا ونأخذ منه 100 ميكرون او 50 ميكرون بالبيبت في 3 أنابيب ..( واحدة لل A... B...D) .

 3 انابيبب كل انبوبة فيها 50 ميكرون دم الى 50 ميكرون من Reagent  A... B...D

لو أخدنا 100 ميكرون دم  نضع 2 نقطة من كل Reagent لان النقطة الواحدة او القطرة يعنى تساوى 50 ميكرون  كما سبق التوضيح

• ندوّر ال3 انابيب في السنتر .
• بعد اخراجهم من السنتر نرجهم جيدا وننظر في الأنبوبة ونرى التلزّن ... اذا كان واضح بعد هذه الخطوات نكتب الفصيلة التى ظهرت ( زى ماطلعت ) .
• أما اذا التلزن الخفيف اللى عملنا بسببه خطوة الغسيل زال وانتهى يبقى كان (ولا حاجة 😃 ) .

مثلا :

لو كانت الفصيلة A+ خفيفة جدا قبل الغسيل ولكن بعد خطوة الغسيل نظرنا في الانبوبة لم نجد التلزن اللى كان ظاهر.. اذن الفصيلة O+ وظهرت A+ لأى سبب وزال السبب بعد الغسيل .

أما اذا أعطت A+ بعد خطوة الغسيل وظهر التلزن في الانبوبة او على شريحة خارجية .. اذن الفصيلة كانت A منذ البداية .. ونكتبها واحنا مطمنين 😉 ...... 

 وختاما .. لايجب الاستهانة بالفصيلة لسهولة التحليل والخطوات (مجرد شكَّة للمريض و3 نقط دم عليهم 3 نقط من المحاليل الكاشفة وانتهى الامر) .. على العكس تماما لابد من التأكد منها جيدا والصبر عليها وقت كافى ونتركها قليلا ثم نعود وننظر اليها علّه ظهر عليها جديد .. وهكذا حتى نتأكد منها تماما تماما فهى تتعلق بالحياه كما ذكرنا 

لذلك :

اذا لم تكن واضحة جيدا وحاسمة بعد مراعاة كل هذه الخطوات والاحتياطات يكون على الكميائي او المتخصص ان يكتب في تقريره عن الفصيلة أنه (( يتم التعامل معها على انها O سواء موجب او سالب )) حتى يخرج من دائرة الخلاف والشك ويكون أأمن للمريض .

 ** نعم التأكد من الفصيلة مهم الى هذه الدرجة كما  أنه يترتب عليها انواع تحاليل اخرى مثل ... التوافق  ... والكومبس .... سوف نستعرضهم في مقالات قادمة ان شاء الله ....  

مبادئ عامة وأساسية في الشغل العملى للتحاليل الطبية بجميع أنواعها / تعرف على اساس الشغل العملى

مبادئ عامة وأساسية في الشغل العملى للتحاليل الطبية بجميع أنواعها / تعرف على اساس الشغل العملى 

مبدأيا:

عند العمل على أى عينة لابد من فصلها أولا في السنترفيوج والشغل بيكون على ناتج الفصل وهو إما

سيرم:

وهى عينة مفصولة بدون مانع تجلط "وهى الاكثر شيوعا".    أو

بلازما:

وهي عينة مفصولة وعليها مانع تجلط .

مانع التجلط:

بيكون مادة Edeta أو Heparine 

والادتا أفضل من الهيبارين لانها لاتكسر كرات الدم وتحافظ عليها.

-وظائف الكبد والكلى شغلها بالكامل على السيرم وبعضها فقط سيرم وبلازما 

-أنواع قليلة من التحاليل يتم العمل فيها على الدم الكامل وبدون فصل وهى (صورة الدم الكاملة CBC - الفصيلة - سرعة الترسيب).

-هناك طريقتان لشغل التحاليل وهما:

1- Colorimatric باللفظ الدارج في المهنة تعنى "الطريقة البطيئة " أو التقليدية يعنى في الشغل المانيوال وبتكون على جهاز تقليدى ايضا.

2-Kinetic or Fixed colorimatric "الطريقة السريعة" وهى من اسمها الاسرع والاحدث في طريقة الشغل ولها أجهزة خاصة ايضا .

* ولايجوز عمل التحاليل السريعة في جهاز البطيئة ولكن جهاز التحاليل السريعة يمكن أن يعمل النوعين .

* وكل نوع له علبة كيماويات أو الشركة المصنعة للكيماويات طالبة ان التحليل يتعمل بنوع معين فيجب الالتزام بالبنفليت الخاص بالشركة .

*كل التحاليل الشغل فيها ب 3 انابيب وهى من الشمال الى اليمين كالتالى :

           "يمين"Blank            Standard             Test"شمال"

ماعدا :

SGPT , SGOT - بيليروبين - هيموجلوبين ...ليس لهم Standard

لانه في تحاليل الهيموجلوبين والبليروبين يعطى في البنفليت رقم ثابت نضرب فيه الناتج ...

أما في SGPT , SGOT  يعطى قراءة تقابل الناتج .

-عينة ال Standard :

ومعنى ال Standard عينة معروف قراءتها ويكون تركيزها مكتوب على الزجاجة .

ونستطيع عمل Factor لعلبة الكيماويات كلها باستخدام هذا التركيز لتفادى عمل  standard في كل تحليل .

وهكذا دائما نستغل التركيز مرة واحدة فقط للعلبة كلها ونخرج ال Factor  ونشتغل التحاليل 

بأنبوبتين  blank , test فقط والناتج نضربه× ال factor

"ملحوظة" :

                اذا عملنا standard على جهاز وغيرنا الجهاز لازم نعمل st. جديد .

             يطلق على عينة ال st. ايضا  اسم calibration ويكون اختصارها "CAL"  على الزجاجة .

*** حساب نتيجة التحليل بدون FACTOR كالاتى :

        (تركيز الst  مثلا) 50 × قراءة الst. ÷ قراءة ال sample

وطبعا القراءة من الشمال الى اليمين .

*** لعمل ال Factor :

تركيز ال st. وليكن 50 ÷ قراءة الst. "المعروفة الان " = الFactor               (القراءة من اليمين)   

-رقم الfactor اللى يطلع نضربه × قراءة ال sample مباشرة دون عمل كل الخطوات السابقة مرة اخرى لحساب ناتج التحليل ,,

أى يكون : 

              ال factor × قراءة ال sample

***علبة الكيماويات "البنفليت " :-

كيفية التعرف عليها للشغل على اساسها :

• أى محلول اسمه Reagent {ممكن يكون ST. او اى نوع محلول اخر }.
• اذا وجدت مادة Powder اذن لابد من حلَّها أما اذا كانت سائل يكون الشغل مباشرة في الغالب "لانه ممكن يكون هناك خلط بين سائلين على حسب النشرة ".
• بها عدة عناوين والنظر للعناوين في البنفليت يكون كالاتى :

ال Reagent مثلا      R1 "كذا"

                              R2 "كذا"

أو البداية تكون مثلا ب R1 أو  R3  وهكذا 

وهذا الترتيب مهم جدا .

• كذلك النظر لل sample  او العينة : يكون مكتوب فيها ان الشغل على السيرم او على البلازما سواء كانت heparinized plasma أوedeta   فالبنفليت هى التى تحدد المادة المانعة للتجلط أيضا .

• كذلك يكون فيها ال options الخاصة بالجهاز :أى كيفية التعامل أو قياس العينة على طول موجى "كذا" .....نصفر الجهاز على "كذا" ...

تحت عنوان "procedure" مثلا :

wave length   :  578nm

temprature  :   20-25

zero adjustment     :  Reagent blank

:

:

وهكذا .

              ***** ملحوظات عامة اساسية *****

-كل الكيماويات توضع في الثلاجة ماعدا :

      (الكرياتينين - البيليروبين - الصوديوم -البوتاسيوم )

                      في حرارة الغرفة .

-ثوابت :

السم = 1000 ميكرون .

القطرة  = 50 ميكرون .

ml = علامة المللى.

علامة الميو وL = علامة الميكرون .

        "علامة الميو تشبة حرف m ناقص ضلع " 

-- أنواع البيبتات -- 

1- ثابتة  (عليها رقم واحد ) .

2-متدرجة (عليها ارقام من كذا الى كذا ) .... 5  - 50 -  100 , .....

وعلى قدر ضبطها تسحب الكمية المرادة  .

مع العلم ان البيبتة تكتين او ضغطتين والسحب يكون عند التكَّة الاولى اللى قبل الاخر .

-يمكنك الاطلاع على ادوات واجهزة المعمل الاساسية ايضا من هنا